Operasi Gladio adalah nama sandi operasi rahasia CIA yang bertujuan untuk membentuk jaringan pasukan rahasia di Eropa Barat, yang siap beraksi jika terjadi invasi atau subversi komunis.
Operasi ini dilakukan dengan melatih dan menyediakan senjata kepada kelompok sayap kanan, nasionalis, atau anti-komunis, yang bersembunyi di bawah tanah atau di tempat-tempat terpencil.
Operasi ini tidak pernah benar-benar digunakan untuk melawan komunis, namun beberapa anggota jaringan Gladio diduga terlibat dalam aksi terorisme, kudeta militer, atau pembunuhan politik di beberapa negara Eropa, seperti Italia, Turki, Belgia, dan Spanyol.
Operasi ini baru terungkap pada tahun 1990-an, setelah beberapa penyelidikan dan pengakuan dari mantan anggota Gladio.